频谱水对大白鼠白细胞粘附和微循环的影响
2019-12-26
【摘要】目的：探讨频谱水预防大鼠白细胞粘附和改善微循环障碍的机理。
【作者简介】刘育英 中国人民解放军总医院原微循环研究室主任，主要从事基础辐射微循环、临床微循环及中医药活血化淤的研究。曾担任中国病理生理学会微循环专业委员会秘书长，微循环学杂志、中国微循环杂志常务编委，中国临床医药研究特约编委，中国保健学会专家组成员。由刘教授主持及主要参加者研究的项目，获军队科技进步一、二、三等奖共6 项； 获国家实用新型专利一项 （ 无损伤毛细血管压测量仪，公告号CN2069258U）。刘教授现为北京大学医学部微循环研究中心副主任、微循环病理生理学会微循环专业委员会委员，中国中西医结合学会微循环专业委员会委员。
方法：静脉内注入内毒素造成白细胞粘附和微循环障碍模型，通过肠系膜微循环观察。计数细静脉相同面积内白细胞粘附数量和微循环的变化。
结果：饮用自来水的对照大鼠60 天后，细静脉血管内白细胞粘附增多，贴壁滚动的白细胞变形性下降，白细胞游出血管外，血流减慢，内皮细胞明显水肿间隙增大，有内皮损伤出血。饮用频谱水的实验组大鼠60 天后，细静脉内有少数白细胞贴壁滚动，比对照组明显减少（P<0.01）。红细胞在毛细血管内快速通过，有轻度红细胞聚集和血小板聚集，未见血栓形成，静脉管壁内皮细胞间连接紧密，管腔内表面平滑。
结论：频谱水能够减轻及改善内毒素引起的微循环障碍， 能显着降低白细胞粘附。
【关键词】频谱水 白细胞粘附 微循环
用频谱水保健治疗仪调制出的频谱水具有与原水不同的振频，频谱水的一些理化特性获得了优化及提高；经临床和近几年对机体饮用的结果显示，频谱水具有很好的保健治病作用； 经检测频谱水无任何毒、副作用。在此基础上，进一步探讨频谱水对白细胞粘附及微循环障碍的预防作用，对促进机体新陈代谢，强身保健的作用机理。为频谱水的推广应用提供生理生化的理论依据。
1. 材料和方法
1.1 动物分组
由北京动物饲养中心提供Wistar 大白鼠、体重220~250g，雌雄均用，动物分为实验组（饮频谱水）和对照组（饮自来水），每组 10只。
1.2 频谱水的制备
本院自来水经广东骏丰频谱实业有限公司生产的
频谱水治疗保健仪处理后，装入动物喂水瓶内，由大鼠自由饮用。
1.3 动物喂养
（1）对照组饮用自来水（由本医院自来水系统提取、未经任何处理）。
（2）实验组饮用频谱水（自来水经由骏丰频谱水治疗保健仪处理后而获得饮用水）。
每只大鼠饮用水量 40~50ml/d、实验动物在饮用 60天后进行实验观察。两组大鼠在实验前 30min用 20%乌拉坦肌肉注射麻醉后，由尾静脉注入内毒素 1mg/kg造成炎症刺激引起白细胞粘附和内皮损伤模型后 30min进行肠系膜微循环观察。
1.4 肠系膜微循环观察方法
1.4.1 仪器设备
Olympus IMT-2型倒置显微镜、显微摄像、录像系统、恒温装置及录像编辑系统。
1.4.2 观察方法
大鼠用 20%乌拉坦溶液 0.7ml/100g肌肉注射麻醉，剪去腹部毛，在腹部正中位作一长约 2cm垂直切口，暴露小肠，将大鼠放在观察板上成仰位，用小镊子轻轻拉出小肠，并将小肠展开放在观察板的观察孔上，选好有微血管的肠系膜，用 Olympus IMT-2型倒置显微镜，用20x、40x物镜进行观察 [3]。通过连接在显微镜上的 CCD彩色摄像机、录微循环的变化，再从重放的录像上观测血细胞的流态、形状，以及红细胞、白细胞、血小板和内皮之间的粘附、内皮损伤及血栓形成等的变化。
1.4.3 白细胞粘附的计数
选择直径 30~40um的细静脉测定 100um长度内白细胞粘附的数量。
1.5 结果分析
实验结果用统计学方式进行统计，用 T-TEST作显着性检验。
2. 结果
2.1 白细胞粘附的变化
对照组大鼠饮用自来水后 30天，用内毒素后 30min，细静脉血管内白细胞粘着性增强，白细胞游出血管外的数量增多。饮用自来水后 60天后白细胞粘附数量也明显增多，白细胞粘着性增强，粘壁滚动的速度减慢 [5-6]。实验组大鼠饮用频谱水后 30~60天，细静脉内有少数白细胞粘壁滚动，比对照组明显减少，P<0.01。（见图
2.2 微循环的变化
对照组大鼠用内毒素后 30min，肠系膜细动脉、细静脉及大鼠饮用频谱水后 60天大鼠肠系膜微循环的变化（%）组别 n 细胞粘附红细胞聚集内皮间隙增大血小板粘附、聚集 血管出血。正常大鼠饮用频谱水后白细胞粘附数（n/0.004nm2）** p<0.01。
毛细血管部分集合毛细血管、血流减慢、红细胞呈泥沙流状。细静脉平均管径30~40um，血流速度为1.205±0.164mm/s。细静脉内见有圆球形红细胞粘附、内皮细胞明显水肿、管壁增厚，表面不光滑、内皮细胞之间间隙增大。有少数内皮损伤出血。实验组饮用频谱水后 30~60天的大鼠，细静脉血流较对照。红细胞在毛细血管内快速通过，有轻度红细胞聚集和血小板聚集，未见血栓形成 [7-8]，脉管壁内皮细胞间连接紧密，管腔内表面平滑。管壁外侧未见细胞粘附和细胞游出，未见红细胞聚集，微循环改变比对照组轻。
3. 讨论
频谱水治疗保健仪将普通饮用水调制处理后与人体器官频谱场相匹配，频谱水之所以优于原水，易被细胞吸收，活化细胞，发挥其保健功能，其主要原因和依据是：经中国计量科学研究院对频谱水进行测定的结果显示频谱水电导率频谱明显高于处理前的自来水，其电导率频谱曲线更接近人体血浆的电导率频谱曲线。北京大学与分子工程学院核磁共振实验室的检测结果显示频谱水与自来水的拉曼光谱有区别。国家城市供水水质检测网北京检测站检测，频谱水溶解氧含量比原水样溶解氧高 5%。这些结果显示频谱水具有优于原水的特殊的水粒子构造，饮用后能迅速进入和渗透到体内各器官、组织细胞内，与之相互作用引发谐振，能被组织细胞很好的吸收和利用，同时对已失调的人体器官频谱场进行调整，使其恢复到正常平衡状态。因此。饮用频谱水对提高机体免疫性，增加机体抗病能力有较好作用，从而达到预防、保健和治疗的效果。本研究通过饮用频谱水的大鼠和内毒素造成微循环障碍的实验模型，检测了实验组和对照组大鼠肠系膜微血管内白细胞粘附和微循环的变化，实验结果显示，饮用频谱水 30~60天的动物，能够显着降低白细胞粘附、明显减轻内皮损伤、血管出血与红细胞粘附；能够减低红细胞聚集，血小板粘附、聚集
能够缓解炎症反应所引起的血流缓慢。证明了在本实验条件下频谱水能够减轻内毒素引发的微循环障碍。因而提示：频谱水具有改善微循环的功能，尤其是能显着降低白细胞粘附。白细胞粘附的降低，则能有效减少白细胞与血管内皮细胞间的相互作用，改善血液流变性，维护正常的血液循环。白细胞粘附的降低，能有效削弱白细胞与接触激活系统的联系，抑制“接触激活”，降低氧自由基的产生，还能有效抑制血小板的激活，进而能够阻断血小板在血管壁的粘附，预防血栓形成。白细胞粘附的降低，还能抑制血管功能紊乱和组织损伤，改善血管生理功能。因此饮用频谱水具有较好的改善微循环的作用。
4. 小结
饮用频谱水具有：
（1）较好的减低红细胞聚集，血小板粘附、聚集；减轻内皮损伤和血管出血。改善微循环，减轻内毒素引发的微循环障碍。
（2）能够明显地降低白细胞的粘附，有效减少白细胞和血管内皮细胞间的相互作用，改善血液流变性，维护正常的血液循环。
参考文献
[1] 田牛，刘育英，李向红等 .微循环的临床与基础 .原子能出版社，
1996，
[2]杨建东，陈德昌，景炳文 .大黄抗内毒素性休克大鼠炎性介质作用的实验研究 .中国危重病急救医学，1998，10（8）：
[3]刘育英，赵秀梅 .不同刺激因素引起血管内白细胞粘附的研究，中国应用生理学杂志，2001，17（3）：
[4] Liu Yuying, Quantitation analysis of mesentence microcirculatory disturbance induced by autonomic nervous imitation, Kelo J, Med, 1992，41：
[5]徐兴祥，孙耕耘，钱桂生 .急性肺损伤大鼠白细胞变形性变化及山茛岩碱影响，中华结核和呼吸杂志，1998，21（10）：
[6] keanmarrec N,Zunic P,Beloucif S.Impact of inhaled nitric oxide onplatelet of cuclic guanosine 5′ Monophosphate. Am J Respir crit CareMed，1998，158（3）：
[7] Moulin F, Pearson JM, Schultze AE. Thrombin is a distal mediatorof lipopolysaccharide induced liver injury in the rat. J SurgRes, 199665（2）：
[8] Qu, X, Huang L, Burthart T, et al. Endotoxin induces PAF.Production in the rat ileum: quantitation of tissue PAF by an mproved method.Prostaglandins, 1996，51（4）：
[9]汪钟，邓植荃 .现代血栓病学 .北京医科大学中国协和大学联出版社
【作者简介】刘育英 中国人民解放军总医院原微循环研究室主任，主要从事基础辐射微循环、临床微循环及中医药活血化淤的研究。曾担任中国病理生理学会微循环专业委员会秘书长，微循环学杂志、中国微循环杂志常务编委，中国临床医药研究特约编委，中国保健学会专家组成员。由刘教授主持及主要参加者研究的项目，获军队科技进步一、二、三等奖共6 项； 获国家实用新型专利一项 （ 无损伤毛细血管压测量仪，公告号CN2069258U）。刘教授现为北京大学医学部微循环研究中心副主任、微循环病理生理学会微循环专业委员会委员，中国中西医结合学会微循环专业委员会委员。
方法：静脉内注入内毒素造成白细胞粘附和微循环障碍模型，通过肠系膜微循环观察。计数细静脉相同面积内白细胞粘附数量和微循环的变化。
结果：饮用自来水的对照大鼠60 天后，细静脉血管内白细胞粘附增多，贴壁滚动的白细胞变形性下降，白细胞游出血管外，血流减慢，内皮细胞明显水肿间隙增大，有内皮损伤出血。饮用频谱水的实验组大鼠60 天后，细静脉内有少数白细胞贴壁滚动，比对照组明显减少（P<0.01）。红细胞在毛细血管内快速通过，有轻度红细胞聚集和血小板聚集，未见血栓形成，静脉管壁内皮细胞间连接紧密，管腔内表面平滑。
结论：频谱水能够减轻及改善内毒素引起的微循环障碍， 能显着降低白细胞粘附。
【关键词】频谱水 白细胞粘附 微循环
用频谱水保健治疗仪调制出的频谱水具有与原水不同的振频，频谱水的一些理化特性获得了优化及提高；经临床和近几年对机体饮用的结果显示，频谱水具有很好的保健治病作用； 经检测频谱水无任何毒、副作用。在此基础上，进一步探讨频谱水对白细胞粘附及微循环障碍的预防作用，对促进机体新陈代谢，强身保健的作用机理。为频谱水的推广应用提供生理生化的理论依据。
1. 材料和方法
1.1 动物分组
由北京动物饲养中心提供Wistar 大白鼠、体重220~250g，雌雄均用，动物分为实验组（饮频谱水）和对照组（饮自来水），每组 10只。
1.2 频谱水的制备
本院自来水经广东骏丰频谱实业有限公司生产的
频谱水治疗保健仪处理后，装入动物喂水瓶内，由大鼠自由饮用。
1.3 动物喂养
（1）对照组饮用自来水（由本医院自来水系统提取、未经任何处理）。
（2）实验组饮用频谱水（自来水经由骏丰频谱水治疗保健仪处理后而获得饮用水）。
每只大鼠饮用水量 40~50ml/d、实验动物在饮用 60天后进行实验观察。两组大鼠在实验前 30min用 20%乌拉坦肌肉注射麻醉后，由尾静脉注入内毒素 1mg/kg造成炎症刺激引起白细胞粘附和内皮损伤模型后 30min进行肠系膜微循环观察。
1.4 肠系膜微循环观察方法
1.4.1 仪器设备
Olympus IMT-2型倒置显微镜、显微摄像、录像系统、恒温装置及录像编辑系统。
1.4.2 观察方法
大鼠用 20%乌拉坦溶液 0.7ml/100g肌肉注射麻醉，剪去腹部毛，在腹部正中位作一长约 2cm垂直切口，暴露小肠，将大鼠放在观察板上成仰位，用小镊子轻轻拉出小肠，并将小肠展开放在观察板的观察孔上，选好有微血管的肠系膜，用 Olympus IMT-2型倒置显微镜，用20x、40x物镜进行观察 [3]。通过连接在显微镜上的 CCD彩色摄像机、录微循环的变化，再从重放的录像上观测血细胞的流态、形状，以及红细胞、白细胞、血小板和内皮之间的粘附、内皮损伤及血栓形成等的变化。
1.4.3 白细胞粘附的计数
选择直径 30~40um的细静脉测定 100um长度内白细胞粘附的数量。
1.5 结果分析
实验结果用统计学方式进行统计，用 T-TEST作显着性检验。
2. 结果
2.1 白细胞粘附的变化
对照组大鼠饮用自来水后 30天，用内毒素后 30min，细静脉血管内白细胞粘着性增强，白细胞游出血管外的数量增多。饮用自来水后 60天后白细胞粘附数量也明显增多，白细胞粘着性增强，粘壁滚动的速度减慢 [5-6]。实验组大鼠饮用频谱水后 30~60天，细静脉内有少数白细胞粘壁滚动，比对照组明显减少，P<0.01。（见图
2.2 微循环的变化
对照组大鼠用内毒素后 30min，肠系膜细动脉、细静脉及大鼠饮用频谱水后 60天大鼠肠系膜微循环的变化（%）组别 n 细胞粘附红细胞聚集内皮间隙增大血小板粘附、聚集 血管出血。正常大鼠饮用频谱水后白细胞粘附数（n/0.004nm2）** p<0.01。
毛细血管部分集合毛细血管、血流减慢、红细胞呈泥沙流状。细静脉平均管径30~40um，血流速度为1.205±0.164mm/s。细静脉内见有圆球形红细胞粘附、内皮细胞明显水肿、管壁增厚，表面不光滑、内皮细胞之间间隙增大。有少数内皮损伤出血。实验组饮用频谱水后 30~60天的大鼠，细静脉血流较对照。红细胞在毛细血管内快速通过，有轻度红细胞聚集和血小板聚集，未见血栓形成 [7-8]，脉管壁内皮细胞间连接紧密，管腔内表面平滑。管壁外侧未见细胞粘附和细胞游出，未见红细胞聚集，微循环改变比对照组轻。
3. 讨论
频谱水治疗保健仪将普通饮用水调制处理后与人体器官频谱场相匹配，频谱水之所以优于原水，易被细胞吸收，活化细胞，发挥其保健功能，其主要原因和依据是：经中国计量科学研究院对频谱水进行测定的结果显示频谱水电导率频谱明显高于处理前的自来水，其电导率频谱曲线更接近人体血浆的电导率频谱曲线。北京大学与分子工程学院核磁共振实验室的检测结果显示频谱水与自来水的拉曼光谱有区别。国家城市供水水质检测网北京检测站检测，频谱水溶解氧含量比原水样溶解氧高 5%。这些结果显示频谱水具有优于原水的特殊的水粒子构造，饮用后能迅速进入和渗透到体内各器官、组织细胞内，与之相互作用引发谐振，能被组织细胞很好的吸收和利用，同时对已失调的人体器官频谱场进行调整，使其恢复到正常平衡状态。因此。饮用频谱水对提高机体免疫性，增加机体抗病能力有较好作用，从而达到预防、保健和治疗的效果。本研究通过饮用频谱水的大鼠和内毒素造成微循环障碍的实验模型，检测了实验组和对照组大鼠肠系膜微血管内白细胞粘附和微循环的变化，实验结果显示，饮用频谱水 30~60天的动物，能够显着降低白细胞粘附、明显减轻内皮损伤、血管出血与红细胞粘附；能够减低红细胞聚集，血小板粘附、聚集
能够缓解炎症反应所引起的血流缓慢。证明了在本实验条件下频谱水能够减轻内毒素引发的微循环障碍。因而提示：频谱水具有改善微循环的功能，尤其是能显着降低白细胞粘附。白细胞粘附的降低，则能有效减少白细胞与血管内皮细胞间的相互作用，改善血液流变性，维护正常的血液循环。白细胞粘附的降低，能有效削弱白细胞与接触激活系统的联系，抑制“接触激活”，降低氧自由基的产生，还能有效抑制血小板的激活，进而能够阻断血小板在血管壁的粘附，预防血栓形成。白细胞粘附的降低，还能抑制血管功能紊乱和组织损伤，改善血管生理功能。因此饮用频谱水具有较好的改善微循环的作用。
4. 小结
饮用频谱水具有：
（1）较好的减低红细胞聚集，血小板粘附、聚集；减轻内皮损伤和血管出血。改善微循环，减轻内毒素引发的微循环障碍。
（2）能够明显地降低白细胞的粘附，有效减少白细胞和血管内皮细胞间的相互作用，改善血液流变性，维护正常的血液循环。
参考文献
[1] 田牛，刘育英，李向红等 .微循环的临床与基础 .原子能出版社，
1996，
[2]杨建东，陈德昌，景炳文 .大黄抗内毒素性休克大鼠炎性介质作用的实验研究 .中国危重病急救医学，1998，10（8）：
[3]刘育英，赵秀梅 .不同刺激因素引起血管内白细胞粘附的研究，中国应用生理学杂志，2001，17（3）：
[4] Liu Yuying, Quantitation analysis of mesentence microcirculatory disturbance induced by autonomic nervous imitation, Kelo J, Med, 1992，41：
[5]徐兴祥，孙耕耘，钱桂生 .急性肺损伤大鼠白细胞变形性变化及山茛岩碱影响，中华结核和呼吸杂志，1998，21（10）：
[6] keanmarrec N,Zunic P,Beloucif S.Impact of inhaled nitric oxide onplatelet of cuclic guanosine 5′ Monophosphate. Am J Respir crit CareMed，1998，158（3）：
[7] Moulin F, Pearson JM, Schultze AE. Thrombin is a distal mediatorof lipopolysaccharide induced liver injury in the rat. J SurgRes, 199665（2）：
[8] Qu, X, Huang L, Burthart T, et al. Endotoxin induces PAF.Production in the rat ileum: quantitation of tissue PAF by an mproved method.Prostaglandins, 1996，51（4）：
[9]汪钟，邓植荃 .现代血栓病学 .北京医科大学中国协和大学联出版社
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