频谱水对大鼠全血粘度和红细胞变形性的影响
2019-12-26
频谱水对正常大鼠和内毒素引起大鼠微循环障碍的预防作用已经进行了研究 [ 1, 2],为进一步探讨频谱水对改善微循环的机理,在上述实验的基础上进行血液流变学的测定,研究频谱水对改善血液粘度和红细胞变形性的作用,为进一步了解频谱水改善微循环、减轻红细胞聚集作用机理,为频谱水的推广应用提供生理生化的理论依据。
1. 材料与方法
1.1 动物分组及喂养
Wistar 大鼠 , 体重230~250g,雌雄均用,动物分为二组,实验组(饮用频谱水)和对照组(饮用自来水),每组 10只。大鼠以常规方式喂养,不给任何药物,饮用频谱水的大鼠每天用饮水瓶装入经骏丰频谱水治疗保健仪处理的自来水自由饮用,每只大鼠饮水量 40~50ml/日,对照组用自来水自由饮用。实验动物分别在饮用30、60天后进行实验。
1.2实验方法
两组大鼠在实验时先用 20%乌拉坦肌肉注射麻醉后,由尾静脉注入内毒素 1mg/kg体重造成炎症刺激引起微循环障碍模型后进行实验。30min后由心脏取血,分别进行细胞电泳和全血粘度、血浆粘度、红细胞变形性的测定。
1.3 血液流变学指标的检测
1.3.1 全血粘度测定
用普利生仪器公司提供的 LBY-N6Y 型锥板式粘度计检测。
方法 :取抗凝血 0. 8 ml在 R80A型锥板式粘度计上测量,切变率范围 1-200s -1,测试温度37℃。
1.3.2 血浆粘度的测定方法
取抗凝血 2ml,离心机 1500转 /分离心 10min,取上清的血浆0.8ml,在 R80A型锥板式粘度计上测量。
1.3.3 红细胞变形指数测定
用 Steellex 公司产 LG-B-190型激光衍射式红细胞变形仪
检测。方法 :取细胞悬浮液 0.8ml加抗凝血40ul,用
型激光射式红细胞变形仪测量。切变率 0-1000 s -1。
1.3.4红细胞电泳测定
仪器用北京六一仪器厂生产的 WD-9408细胞电泳仪、OlympusHB-2生物显微镜,显微摄像仪、监视器、Video 视频刻度尺。方法:取静脉血 10ul加入装有 0.4ml红细胞悬液的试管内混匀待用。测量时,用毛细玻璃管内吸入红细胞悬液,将毛细管放置在细胞电泳支架上,两端用 1%琼脂胶封固,并接上连接在电泳仪控制器上的电源线,把细胞电泳支架放在显微镜下,用 10X或 20X物镜进行观察,调好焦距后,计算红细胞移动 100um所需要的时间, 结果以红细胞移动 um/s表示。
1. 4 统计学处理
实验结果用统计学方式进行统计,用 t-TEST作显着性检验。
2. 结果
2. 1 频谱水对血液粘度的影响
实验组大鼠饮用频谱水后 30天,血液粘度明显比对照组低,在低切状态下粘度差别较大,降低约20%;饮用频谱水 60天的大鼠,血粘度从高切到低切均低于对照组。血浆粘度也比对照组低,降低约17%。正常大鼠饮用频谱水后血粘度变化(mPa·s,x±s,n均
天数组别 10s-1 60s-1 200s-1血浆30天
对照组 12.41± 1.732) 7.05±1.72 5.23±1.07 1.19±
实验组 15.50±3.47 7.89±1.53 5.46±0.95 1.05±0.1760天
对照组 11.85±3.891) 6.14±1.56 4.46±0.85 1.05±
实验组 12.82±2.21 7.07±1.31 5.21±1.04 1.27±
*注:与对照组比较,1) p>0.05,
大鼠饮用频谱水后血液粘度的变化
2.2细胞电泳速度的变化
大鼠饮用频谱水后 30天,红细胞电泳比对照组快,60天较明显,二组间细胞电泳速度经统计学处理,p<0.05。
2.3 红细胞变形性的变化切变率从 0s -1~1000s-1,红细胞变形指数稍有变化,频谱水的动物第 30天 ~60天二组间变形指数相近,未见有明显差
别。正常大鼠饮用频谱水后红细胞变形指数
(x±s,n均=10)切变率 (s -1)组别 0 600 100030天
实验组 0.0005±0.0005 0.5785±0.0348 0.6247±
对照组 0.0005±0.0003 0.5894±0.0194 0.6327±0.025860天
实验组 0.0003±0.0003 0.6002±0.0418 0.6506±
对照组 0.0003±0.0005 0.5846±0.0455 0.6548±
注:两组间比较,
3. 讨论
有研究显示磁化水可使血液流变学特性发生改变 [3-5]。我们前期的研究证明饮用频谱水后,可减轻内毒素引起白细胞粘附;红细胞、血小板聚集、血流减慢;内皮水肿、管壁增厚;内皮细胞间间隙增大、血管内皮损伤、出血等微循环障碍 [1,2]。本研究通过饮用频谱水大鼠造成微循环障碍的实验模型,在饮用频谱水 30~60天后,检测了实验组和对照组大鼠全血粘度的变化,结果显示饮用频谱水的大鼠血液粘度均比对照组低。红细胞电泳速度的提高说明红细胞的表面电荷密度增大,将有利于降低红细胞的聚集性,结果提示频谱水可增大红细胞表面电荷,降低血液的粘度。低切变率时也显示频谱水也能降低血液粘度,这都表明红细胞表面电荷增加对降低血液粘度的作用。北京生物制品研究所对频谱水的电导率测定结果 :频谱水的电导率大于自来水而接近血浆,中国计量科学研究院对频谱水测定结果显示,频谱水电导率频谱明显高于处理前的自来水,其电导率频谱曲线更接近人血浆的电导率频谱曲线等也说明这一点。此外影响血液粘度的因素还有血浆的理化特性,如 O 2、pH及血浆渗透压等,以往的理化实验显示与原水相比,频谱水的 O 2、pH及血浆渗透压发生一定变化,这些变化均影响血液粘度 ,以上实验结果均表明频谱水具有较好的改善由内毒素引起机体血液粘度的变化。此外 ,红细胞变形性与红细胞膜的流动性有关,介质粘度也影响红细胞的变形性,在相同切应力下,介质粘度越高,红细胞变形性越大 [6],实验显示频谱水能降低血液粘度,对红细胞变形性无明显影响,这与血液粘度的变化是一致的。通过对血液粘度的测定,饮用自来水的大鼠注内毒素后血液粘度明显增高,而饮用频谱水的动物血液粘度比对照组低,可能与经调剂后频谱水的导电率增加有关。有利于血浆的流动性。同时也有利于改善血液粘度和微循环,使血液粘度恢复到正常平衡状态,从而达到预防、保健和治疗的效果。
参考文献
[1] 刘育英,赵秀梅,刘凤英。 频谱水对大鼠白细胞粘附和微循环影响。 中华使用医药杂志, 2002,2(6):
[2]刘育英,赵秀梅,刘凤英 .频谱水对大鼠血浆白介素 1、6和白细胞行为的影响。 微循环学杂志,2002,12(2):
[3]赵大元,吕遐龄,诸挥明 .磁处理水对小鼠生物效应的实验研究中华理疗杂志,1998,21(5):
[4]王宝芳,唐文春,徐晓波,磁处理水与藻酸双酯钠对高脂血症大鼠的影响。 中华理疗杂志, 2000,23(6):
[5] 张西洲,何富文,陈占诗。 吸入一氧化氮治疗高原肺水肿对血流 变学的影响,西藏医药杂志,2000,21(2):
[6] 王豫廉,王鸿利,王学峰。 饮用碱性离子水后对部分凝血因子性 的影响 .上海医学检验杂志,2000,15(6):
1. 材料与方法
1.1 动物分组及喂养
Wistar 大鼠 , 体重230~250g,雌雄均用,动物分为二组,实验组(饮用频谱水)和对照组(饮用自来水),每组 10只。大鼠以常规方式喂养,不给任何药物,饮用频谱水的大鼠每天用饮水瓶装入经骏丰频谱水治疗保健仪处理的自来水自由饮用,每只大鼠饮水量 40~50ml/日,对照组用自来水自由饮用。实验动物分别在饮用30、60天后进行实验。
1.2实验方法
两组大鼠在实验时先用 20%乌拉坦肌肉注射麻醉后,由尾静脉注入内毒素 1mg/kg体重造成炎症刺激引起微循环障碍模型后进行实验。30min后由心脏取血,分别进行细胞电泳和全血粘度、血浆粘度、红细胞变形性的测定。
1.3 血液流变学指标的检测
1.3.1 全血粘度测定
用普利生仪器公司提供的 LBY-N6Y 型锥板式粘度计检测。
方法 :取抗凝血 0. 8 ml在 R80A型锥板式粘度计上测量,切变率范围 1-200s -1,测试温度37℃。
1.3.2 血浆粘度的测定方法
取抗凝血 2ml,离心机 1500转 /分离心 10min,取上清的血浆0.8ml,在 R80A型锥板式粘度计上测量。
1.3.3 红细胞变形指数测定
用 Steellex 公司产 LG-B-190型激光衍射式红细胞变形仪
检测。方法 :取细胞悬浮液 0.8ml加抗凝血40ul,用
型激光射式红细胞变形仪测量。切变率 0-1000 s -1。
1.3.4红细胞电泳测定
仪器用北京六一仪器厂生产的 WD-9408细胞电泳仪、OlympusHB-2生物显微镜,显微摄像仪、监视器、Video 视频刻度尺。方法:取静脉血 10ul加入装有 0.4ml红细胞悬液的试管内混匀待用。测量时,用毛细玻璃管内吸入红细胞悬液,将毛细管放置在细胞电泳支架上,两端用 1%琼脂胶封固,并接上连接在电泳仪控制器上的电源线,把细胞电泳支架放在显微镜下,用 10X或 20X物镜进行观察,调好焦距后,计算红细胞移动 100um所需要的时间, 结果以红细胞移动 um/s表示。
1. 4 统计学处理
实验结果用统计学方式进行统计,用 t-TEST作显着性检验。
2. 结果
2. 1 频谱水对血液粘度的影响
实验组大鼠饮用频谱水后 30天,血液粘度明显比对照组低,在低切状态下粘度差别较大,降低约20%;饮用频谱水 60天的大鼠,血粘度从高切到低切均低于对照组。血浆粘度也比对照组低,降低约17%。正常大鼠饮用频谱水后血粘度变化(mPa·s,x±s,n均
天数组别 10s-1 60s-1 200s-1血浆30天
对照组 12.41± 1.732) 7.05±1.72 5.23±1.07 1.19±
实验组 15.50±3.47 7.89±1.53 5.46±0.95 1.05±0.1760天
对照组 11.85±3.891) 6.14±1.56 4.46±0.85 1.05±
实验组 12.82±2.21 7.07±1.31 5.21±1.04 1.27±
*注:与对照组比较,1) p>0.05,
大鼠饮用频谱水后血液粘度的变化
2.2细胞电泳速度的变化
大鼠饮用频谱水后 30天,红细胞电泳比对照组快,60天较明显,二组间细胞电泳速度经统计学处理,p<0.05。
2.3 红细胞变形性的变化切变率从 0s -1~1000s-1,红细胞变形指数稍有变化,频谱水的动物第 30天 ~60天二组间变形指数相近,未见有明显差
别。正常大鼠饮用频谱水后红细胞变形指数
(x±s,n均=10)切变率 (s -1)组别 0 600 100030天
实验组 0.0005±0.0005 0.5785±0.0348 0.6247±
对照组 0.0005±0.0003 0.5894±0.0194 0.6327±0.025860天
实验组 0.0003±0.0003 0.6002±0.0418 0.6506±
对照组 0.0003±0.0005 0.5846±0.0455 0.6548±
注:两组间比较,
3. 讨论
有研究显示磁化水可使血液流变学特性发生改变 [3-5]。我们前期的研究证明饮用频谱水后,可减轻内毒素引起白细胞粘附;红细胞、血小板聚集、血流减慢;内皮水肿、管壁增厚;内皮细胞间间隙增大、血管内皮损伤、出血等微循环障碍 [1,2]。本研究通过饮用频谱水大鼠造成微循环障碍的实验模型,在饮用频谱水 30~60天后,检测了实验组和对照组大鼠全血粘度的变化,结果显示饮用频谱水的大鼠血液粘度均比对照组低。红细胞电泳速度的提高说明红细胞的表面电荷密度增大,将有利于降低红细胞的聚集性,结果提示频谱水可增大红细胞表面电荷,降低血液的粘度。低切变率时也显示频谱水也能降低血液粘度,这都表明红细胞表面电荷增加对降低血液粘度的作用。北京生物制品研究所对频谱水的电导率测定结果 :频谱水的电导率大于自来水而接近血浆,中国计量科学研究院对频谱水测定结果显示,频谱水电导率频谱明显高于处理前的自来水,其电导率频谱曲线更接近人血浆的电导率频谱曲线等也说明这一点。此外影响血液粘度的因素还有血浆的理化特性,如 O 2、pH及血浆渗透压等,以往的理化实验显示与原水相比,频谱水的 O 2、pH及血浆渗透压发生一定变化,这些变化均影响血液粘度 ,以上实验结果均表明频谱水具有较好的改善由内毒素引起机体血液粘度的变化。此外 ,红细胞变形性与红细胞膜的流动性有关,介质粘度也影响红细胞的变形性,在相同切应力下,介质粘度越高,红细胞变形性越大 [6],实验显示频谱水能降低血液粘度,对红细胞变形性无明显影响,这与血液粘度的变化是一致的。通过对血液粘度的测定,饮用自来水的大鼠注内毒素后血液粘度明显增高,而饮用频谱水的动物血液粘度比对照组低,可能与经调剂后频谱水的导电率增加有关。有利于血浆的流动性。同时也有利于改善血液粘度和微循环,使血液粘度恢复到正常平衡状态,从而达到预防、保健和治疗的效果。
参考文献
[1] 刘育英,赵秀梅,刘凤英。 频谱水对大鼠白细胞粘附和微循环影响。 中华使用医药杂志, 2002,2(6):
[2]刘育英,赵秀梅,刘凤英 .频谱水对大鼠血浆白介素 1、6和白细胞行为的影响。 微循环学杂志,2002,12(2):
[3]赵大元,吕遐龄,诸挥明 .磁处理水对小鼠生物效应的实验研究中华理疗杂志,1998,21(5):
[4]王宝芳,唐文春,徐晓波,磁处理水与藻酸双酯钠对高脂血症大鼠的影响。 中华理疗杂志, 2000,23(6):
[5] 张西洲,何富文,陈占诗。 吸入一氧化氮治疗高原肺水肿对血流 变学的影响,西藏医药杂志,2000,21(2):
[6] 王豫廉,王鸿利,王学峰。 饮用碱性离子水后对部分凝血因子性 的影响 .上海医学检验杂志,2000,15(6):